
化易AI
2024-08-09回答
在液相色譜法中,沖洗柱子通常使用流動(dòng)相或者特定的溶劑組合。以下是幾種常用的沖洗方法: 1. 反相色譜柱:使用甲醇:水=90:10、純甲醇(HPLC級)、異丙醇(HPLC級)、二氯甲烷(HPLC級)等溶劑作為流動(dòng)相,依次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的色譜柱體積,然后再以相反的次序沖洗。 2. 正相色譜柱:使用正己烷(HPLC級)、異丙醇(HPLC級)、二氯甲烷(HPLC級)、甲醇(HPLC級)等溶劑做流動(dòng)相,順次沖洗,每種流動(dòng)相流經(jīng)色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高)。注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷。所有的流動(dòng)相必須嚴(yán)格脫水。 3. 離子交換色譜柱:長時(shí)間在緩沖溶液中使用和進(jìn)樣,將導(dǎo)致色譜柱離子交換能力下降。用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。 4. 先用純水沖洗柱子,每次沖洗50毫升,共沖洗兩次。這一步主要是去除柱子內(nèi)的雜質(zhì)和殘留物。 5. 接著用甲醇沖洗柱子,每次沖洗50毫升,共沖洗兩次。這一步主要是去除柱子內(nèi)的水分,因?yàn)榧状伎梢院芎玫厍宄帧?6. 如果需要進(jìn)一步清潔柱子,可以用異丙醇或正己烷等有機(jī)溶劑進(jìn)行沖洗。每次沖洗50毫升,共沖洗兩次。這一步主要是去除柱子內(nèi)的有機(jī)雜質(zhì)。 請注意,這些步驟僅供參考,具體操作可能因?qū)嶒?yàn)條件和要求而有所不同。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前,請仔細(xì)閱讀相關(guān)文獻(xiàn)和儀器說明書,以確保正確操作并獲得準(zhǔn)確結(jié)果。